⑴ 流式三色荧光怎么选不用做补偿

三色抗体命名为A、B、C
同型对照（阴性对照）管：A同型+B同型+C同型
单阳性对照
A检测管：A+B同型+C同型
B检测管：B+A同型+C同型
C检测管：C+A同型+B同型
不存在荧光重叠的两个抗体不需要调节补偿。

样本为PBMC，想用三色标记Treg细胞，分别为CD4-PECY，CD25-Fitc，Foxp3-PE，想知道如何设置荧光补偿，用的是BD的流式仪，1、是设置阴性管一个，单阳性管每种一个，样品管一个么？

荧光素强度依次为PE， PECY5 APC FITC, PE最强，FITC最弱。 所以，建议抗体组合为：
Foxp3-PE，CD4-FITC，CD25-PECy5.5或者CD25-APC。
同时购买三个相应的同型对照抗体。
样品管设置如下：
1. cell + FITC-isotype + Pecy5.5（ or APC）-isotype + PE-isotype
2. Cell + FITC-isotype + CD25-mAb + PE-isotype
3. Cell + PE-mAb + FITC-isotype + Pecy5.5（ or APC）-isotype
4. Cell + CD4-FITC + Foxp3-PE + CD25 -PECy5.5( or APC)。 [这一管的数据可以拿来分析用]。

在充分了解调整电压和补偿原理的基础上，也可以做一些简化。如果不太懂，就按照这个来。其中Foxp3的抗体和同型对照抗体都是在固定破膜以后再加，不是与CD4或者CD25同时加。

⑵ 流式细胞仪如何选荧光

几个基本原则：

  1. 必须是现有机器配置可以检测到的。

  2. 对于多色实验，荧光素本身的荧光强度和抗原表达的水平应该是反比。简单的说表达多的抗原所使用的荧光素要选相对较暗的，而表达低的就选较亮的。

  3. 多色实验最好选不同激光激发，释放光谱重叠小的荧光素。

⑶ 流式机器上看到的那种锯齿状荧光强度的图怎么做

锯齿状荧光强度的图每个峰下面积除以细胞数就是平均荧光强度，在流式细胞仪分析完结果后会出据平均荧光强度的数值，你可以看一下你的原始数据。右边这张图纵坐标的刻度显示的就是平均荧光强度了，你对应纵坐标的刻度看就知道了，只不过你看不出精确的数值。你问的是哪张图？这两张图是什么关系？这些你都没说清楚，别人就不能第一时间提供给你想知道的答案，建议下次把问题描述清楚。

⑷ 如何选择流式荧光

这个问题有点不好说，每个荧光都有自己在某个波长的最大吸收峰，原则上最大吸收峰差的越远补偿越小，FITC PE APC 最常用的三个荧光，一般一管染三种抗体就选这三个颜色，便宜，而且好染。如果再加的话可以选PE-cy7或APC-cy7，个人觉得可以，一管不宜染太多种抗体，到时候很难分析，补偿也大，结果不准确。 同时，建议你做原代细胞流式考虑染死亡细胞（7AAD）。对了，最好不用Percy 5.5，不好染。
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⑸ 流式荧光杂交法和pcr是一样的吗

流式是检测相对荧光强度的，最后的信号高低取决于检测时机器PMT上所施加的电压。而PCR是核酸体外扩增的一种手段。所以两者是不同的哟。。

⑹ 流式细胞仪的荧光通路是什么意思

流式细胞术工作原理是在细胞分子水平上通过单克隆抗体对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析。它可以高速分析上万个细胞，并能同时从一个细胞中测得多个参数，具有速度快、精度高、准确性好的优点，是当代最先进的细胞定量分析技术之一。
光源、液流通路、信号检测传输和数据的分析系统是流式细胞仪的主要组成。目前临床中运用流式细胞仪进行外周血白细胞、骨髓细胞以及肿瘤细胞等的检测是临床检测的重要组成部分。